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Athena C18-WP 反相色谱柱[方法开发首选,适合各种流动相条件] Athena C18-WP 采用高纯球形硅胶基质,具有优异的稳定性,可以使用100% 纯水作为流动相,用于分离酸性、中性和碱性有机化合物,以及许多药物和多肽等。多种规格,从分析级到制备级均可提供。 Athena C18-WP 粒径 (μm) 孔径 (Å) 孔容积 (mL/g) 比表面积 (m2/g) 金属杂质 (ppm) 含碳量 pH 范围 温度范围 (℃ ) 储存溶剂 3 和 5 100 1.1 450 〈10 17.00% 1.5-10 20-60 乙腈 特点: ● 键合C18 基团; ● pH 稳定范围为1.5-10; ● 适合于100% 水流动相; ● 极性物质保留强; ● 碱性物质峰形对称; ● 高比表面积,适于高载量。 pH稳定性 低pH条件下的稳定性 高pH条件下的稳定性 在低pH值流动相中,色谱柱寿命缩短的主要原因是化学键合基团因水解作用而从基体硅胶上脱离。水解作用导致分析物保留时间明显改变,从而使色谱柱寿命缩短,重现性差。 下图表明Athena C18-WP在pH1.5流动相条件下的稳定性。 低pH耐受(pH 1.5) 色谱柱 Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm 流动相 乙腈 : 0.1% 三氟乙酸 (pH 1.5) (50/50) 流速 1.0 mL/min 检测 UV 254 nm 柱温 30 ˚C 样品 甲苯 在高pH值流动相中,硅胶基质会逐渐溶解,普通硅胶基质色谱柱的pH适用范围为2-8,当流动相pH值超过8时,硅胶的溶解加速, 色谱柱寿命非常短。而Athena C18-WP色谱柱由于独特的键合技术和封尾技术,很好的保护了硅胶基质,使其在高pH值条件下有较长的寿命。 高pH耐受(pH 11.0) 色谱柱 Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm 流动相 甲醇 : 0.5% 氨水 (pH 11.0) (20/80) (50/50) 流速 1.0 mL/min 检测 UV 254 nm 柱温 30 ℃ 样品 邻苯二甲酸二丙酯 100%水相稳定性 普通硅胶基质反相色谱柱不能在高比例水流动相条件下使用,必须保持流动相中有机相比例5%以上。而这也限制了一些极性化合物在反相条件下的分离。其原因就是疏水塌陷。 “疏水塌陷”指普通反相填料在使用高比例水流动相时,键合的官能团由于疏水作用,流动相不浸润固定相表面,使得硅胶表面的键合相链平铺,色谱柱丧失对化合物的保留能力。 据研究,疏水塌陷一般发生在流动相停止后再流动的阶段。所以停流实验可以验证填料的耐纯水性。实验方法是测试柱效后,用100%水流动相1.0mL/min流速冲2小时,流速逐渐降为0后停泵1小时。之后再恢复水流动相,一段时间后切换为测试柱效条件。比较停流前后保留的差异。 测试条件 色谱柱 Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm 流动相 甲醇 : 水 (70/30) 流速 1.0 mL/min 检测 UV 254 nm 柱温 30 ˚C 样品 1. 尿嘧啶 2. 甲苯 3. 萘 停流实验 A 为停流前 B 为停流后 (A) (B)
Athena C18-WP 反相色谱柱[方法开发首选,适合各种流动相条件]
Athena C18-WP 采用高纯球形硅胶基质,具有优异的稳定性,可以使用100% 纯水作为流动相,用于分离酸性、中性和碱性有机化合物,以及许多药物和多肽等。多种规格,从分析级到制备级均可提供。
Athena C18-WP
粒径 (μm)
孔径 (Å)
孔容积 (mL/g)
比表面积 (m2/g)
金属杂质 (ppm)
含碳量
pH 范围
温度范围 (℃ )
储存溶剂
3 和 5
100
1.1
450
〈10
17.00%
1.5-10
20-60
乙腈
特点:
● 键合C18 基团;
● pH 稳定范围为1.5-10;
● 适合于100% 水流动相;
● 极性物质保留强;
● 碱性物质峰形对称;
● 高比表面积,适于高载量。
pH稳定性
在低pH值流动相中,色谱柱寿命缩短的主要原因是化学键合基团因水解作用而从基体硅胶上脱离。水解作用导致分析物保留时间明显改变,从而使色谱柱寿命缩短,重现性差。 下图表明Athena C18-WP在pH1.5流动相条件下的稳定性。
低pH耐受(pH 1.5) 色谱柱 Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm 流动相 乙腈 : 0.1% 三氟乙酸 (pH 1.5) (50/50) 流速 1.0 mL/min 检测 UV 254 nm 柱温 30 ˚C 样品 甲苯
色谱柱
Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm
流动相
乙腈 : 0.1% 三氟乙酸 (pH 1.5) (50/50)
流速
1.0 mL/min
检测
UV 254 nm
柱温
30 ˚C
样品
甲苯
高pH耐受(pH 11.0) 色谱柱 Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm 流动相 甲醇 : 0.5% 氨水 (pH 11.0) (20/80) (50/50) 流速 1.0 mL/min 检测 UV 254 nm 柱温 30 ℃ 样品 邻苯二甲酸二丙酯
甲醇 : 0.5% 氨水 (pH 11.0) (20/80) (50/50)
30 ℃
邻苯二甲酸二丙酯
100%水相稳定性
普通硅胶基质反相色谱柱不能在高比例水流动相条件下使用,必须保持流动相中有机相比例5%以上。而这也限制了一些极性化合物在反相条件下的分离。其原因就是疏水塌陷。
“疏水塌陷”指普通反相填料在使用高比例水流动相时,键合的官能团由于疏水作用,流动相不浸润固定相表面,使得硅胶表面的键合相链平铺,色谱柱丧失对化合物的保留能力。
据研究,疏水塌陷一般发生在流动相停止后再流动的阶段。所以停流实验可以验证填料的耐纯水性。实验方法是测试柱效后,用100%水流动相1.0mL/min流速冲2小时,流速逐渐降为0后停泵1小时。之后再恢复水流动相,一段时间后切换为测试柱效条件。比较停流前后保留的差异。
测试条件 色谱柱 Athena C18-WP, 4.6 x 150 mm, 5μm 流动相 甲醇 : 水 (70/30) 流速 1.0 mL/min 检测 UV 254 nm 柱温 30 ˚C 样品 1. 尿嘧啶 2. 甲苯 3. 萘
甲醇 : 水 (70/30)
1. 尿嘧啶 2. 甲苯 3. 萘
停流实验 A 为停流前 B 为停流后
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